众所周知，肺癌是中国乃至世界的头号癌症杀手，且发病率持续增加。我国每年新发肺癌病例73.3万，其中非小细胞肺癌占80%～85%，是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤[1]。在中国的非小细胞肺癌患者中，约有30%-40%发生EGFR突变[2~3]，而接受过 EGFR-TKI 药物（如吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼）治疗的EGFR突变患者（8-10个月后）中，约50~65%的患者会由于 T790M 突变而产生耐药[4]，导致疾病再次进展，患者亟需得到新的治疗方案。

　　第一/二代EGFR TKI获得性耐药的生物学机制[4]

　　奥希替尼：中国首个获批的第三代肺癌靶向药物

　　2017年03月24日，国家食品药品监督管理总局（CFDA）正式批准第三代肺癌靶向药物泰瑞沙（甲磺酸奥希替尼片，AZD9291）用于既往经表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗时或治疗后出现的疾病进展，并且经检测确认存在EGFR T790M突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞性肺癌(NSCLC)成人患者的治疗，这无疑进一步延续和提升肺癌患者的靶向治疗方案，让更多中国肺癌患者继续获得高质量的生存。

　　针对EGFR敏感性突变及T790M突变的第三代口服、

　　不可逆的选择性EGFR突变抑制剂- Osimertinib（奥希替尼）

　　自2015年11月13日获美国FDA批准上市以来，奥希替尼已经在美国（2015.11.13）、欧洲（2016.2.2）、日本（2016.3.28）、中国（2017.3.24）、加拿大、瑞典、以色列、墨西哥、澳大利亚等47个国家及地区上市。

　　EGFR T790M突变—血液检测，还是组织检测？

　　随着奥希替尼在中国上市，对于EGFR T790M突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞性肺癌(NSCLC)成人患者来说是一大福音，会让更多中国肺癌患者获得高质量的生存。因此，对于中国非小细胞肺癌患者第一/二代EGFR TKIs耐药后，EGFR T790M检测变得尤为重要[5]。

　　目前，针对EGFR T790M的检测，可采用组织检测和血液检测（ctDNA）；组织检测是金标准，但是组织活检侵袭性，连续的活检不易获得，严重时可能产生并发症，也不能代表肿瘤异质性，并且再次穿刺活检患者可能产生抵触情绪等劣势；而对于血液检测，其信息丰富、无创、方便，可为临床提供更多的选择，也可作为组织检测很好的补充。

　　对于EGFR T790M检测应该使用血液样本，还是组织样本？

　　相关指南中有明确的建议：

　　2017版《CSCO 原发性肺癌诊疗指南》建议：进行二次活检，对继发耐药 EGFR T790M 进行检测，不能行组织学检测的患者可行血液 ctDNA T790M 检测（I 类证据）；

　　2017年第5版非小细胞肺癌（NSCLC）临床实践指南：如果组织检测不易进行，可以进行血液检测；如果血液检测T790M突变为阴性，则考虑进行组织检测。

　　行业大会和科研期刊中也有相关报道：

　　2016年，ELCC大会摘要报道，晚期EGFR突变阳性的NSCLC患者的血浆ctDNA中分析T790M的突变状态，研究结果表明：60%的EGFR T790M突变的NSCLC患者可以利用血浆检测取代侵入性的组织检测。

　　2017年，AURA3的研究结果发表在《NEJM》杂志上，表明血液中检测T790M阳性患者使用奥希替尼治疗获益与组织相当，并且血液检测T790M阳性患者与组织检测的T790M阳性患者使用奥希替尼治疗的预后情况相似[6]。

　　可以看出，临床上的EGFR T790M的检测优选血液检测；若为阴性，则选择组织检测进行补充。

　　Digital PCR 平台——精确定量血液中的低频突变

　　目前，针对血液中ctDNA进行检测的技术方法主要有Sanger sequencing、Next-generation sequencing、Quantative PCR、ARMS-PCR和Digital PCR等技术，其检测ctDNA的灵敏度有很大的不同，对于血液中ctDNA的检测需要高灵敏的技术进行，而Digital PCR技术是目前灵敏度最高的突变检测方法之一（如下表）[7]。

　　 血液中ctDNA不同检测技术的比较

　　数字PCR技术是一种新的DNA检测和绝对定量方法，其采用高密度芯片技术，样本均匀分配至20000个单独的纳米硅基反应孔进行独立的PCR反应，最后通过对每个纳米孔荧光信号的有或无实现核酸绝对定量。可以实现高达0.1%的检测灵敏度，为无法取得二次活检的耐药患者提供了更多的可能性。数字PCR技术既能定量、也能定性，其检测基因突变的特异性高。

　　 Digital PCR平台

　　2016年4月7日，一项前瞻性验证研究旨在分析Digital PCR技术用于快速检测肺癌患者中EGFR和KRAS基因突变，以及EGFR T790M耐药突变的可行性，相关的结果发表于《JAMA Oncology》杂志[8]。其研究结果表明：液体活检技术的结果周期远低于传统组织活检技术，并且液体活检检测结果与传统的组织活检一致性较高，可以取代组织活检技术。

　　因此，利用高灵敏的数字PCR平台检测血液中EGFR突变状态，其将是未来检测T790M的首选的检测方式。

　　肺癌无创EGFR T790M耐药检测——指导非小细胞肺癌患者精准用药

　　基于Thermo Fish的QuantStudio™ 3D数字PCR平台，自主开发Digital PCR肺癌EGFR T790M耐药检测，仅需要10ml全血，检测血液中突变丰度为0.1%以上的突变：

　　准确定量T790M的突变丰度，为中国肺癌患者提供精准用药指导；

　　也可进行多次检测实时动态监控突变丰度变化，及时发现疾病进展，调整治疗方案。

　　海得康发掘国际新药动态，为国内患者提供全球已上市药品的咨询服务，如丙肝新药印度吉三代、肝癌新药印度多吉美、PD-1、PD-L1、肺癌AZD9291等，帮助国内患者选择更新更有效的治疗药物和手段，更多药品信息及购药渠道，详询：400-001-9763,010-67385800，微信：headkonhdk  。